[Streszczenie] Cel Określenie N-końcowych 15 reszt aminokwasowych dwóch podobnych podjednostek agakutyny.Dwie podjednostki cząsteczki enzymu muszą zostać podzielone, aby uzyskać pojedynczy łańcuch peptydowy podjednostki i zsekwencjonować.Metodyka Wysoko oczyszczoną agakutynę otrzymano metodą biochemiczną.Próbki pojedynczych podjednostek do identyfikacji i sekwencjonowania przygotowano za pomocą rozdzielania elektroforetycznego SDS-PAGE, odzyskiwania paska samoprzylepnego podjednostek i technologii elektrotransferu membranowego PVDF.Ten ostatni określił 15 reszt aminokwasowych na N-końcu podjednostki metodą degradacji Edmana.Wyniki Sekwencja dużej podjednostki (16 kDa) to DCSSGWSSYEEHQYY, a małej podjednostki (15 kDa) to DSSGWSSYEGHEYYV.Wnioski Wyniki sekwencjonowania wykazały, że agakutyna była nowym trombinopodobnym enzymem jadu węża, przeszukując bazę danych NCBI.
Czas postu: 22 grudnia 2022 r